Singkong (Manihot utilissima) adalah salah satu jenis tanaman berkarbohidrat tinggi yang banyak tumbuh di Indonesia. Salah satu pengolahan singkong yang paling umum dan sederhana adalah dijadikan tape. Penelitian ini bertujuan : mempelajari proses fermentasi singkong untuk mendapatkan senyawa alkohol sebagai bahan dekomposisi oleh bakteri pembentuk asam, mengetahui karakteristik bakteri pembentuk asam pada fermentasi tape singkong dan mendapatkan isolat bakteri Acetobacteri aceti penghasil asam asetat pada proses fermentasi tape singkong. Penelitian ini menggunakan metode deskriptif kualitatif, dengan pengamatan secara makroskopis, mikroskopis dan pengecatan gram pada isolat bakteri pembentuk asam yang telah terpilih dan berhasil di isolasi dari fermentasi singkong. Hasil yang diperoleh koloni yang menunjukan zona bening adalah koloni yang menghasilkan asam dan bereaksi dengan ion karbonat, pada uji gram didapatkan genus bakteri yang diperoleh berdasarkan hasil isolasi pada tape singkong yaitu sebagian termasuk genus Acetobacter dengan gram negatif (berwarna merah) dan sebagian genus Lactobacillus dengan gram positif (berwarna ungu). Adanya rasa asam pada tape disebabkan bakteri pembentuk asam setelah adanya alkohol oleh jamur Saccharomyces cereviae.