Dalam kultur in vitro, penyerapan cahaya dan nitrogen berperan penting terhadap pertumbuhan anggrek Dendrobium sp. Cahaya mempengaruhi penyerapan nutrisi tanaman, sehingga nitrogen harus ditambahkan dalam jumlah yang tepat untuk pertumbuhan optimal. Teknologi Nanobubbles (NBs) telah dikembangkan untuk mengubah nitrogen menjadi partikel yang lebih kecil agar memudahkan penyerapan oleh tanaman. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pemberian spektrum warna dan NBs N2 terhadap pertumbuhan anggrek Dendrobium sp. Metode penelitian eksperimental dengan perlakuan media (MS; MS ₊ ZPT; MS ₊ NBs N2; MS ₊ ZPT ₊ NBs N2) dan spektrum warna (putih, merah, biru, merah-biru). Data persentase hidup, panjang planlet dan berat planlet dianalisis secara deskriptif dan uji statistik (normalitas, homogenitas, multivariat, dan Games Howell). Hasil penelitian menunjukkan bahwa pada persentase hidup planlet tertinggi yaitu 97,91% terdapat pada perlakuan spektrum warna merah dan merah-biru. Spektrum warna merah-biru berpengaruh dalam meningkatkan berat planlet sebesar 0,363 g pada perlakuan MS dan pemberian spektrum warna merah berpotensi meningkatkan panjang planlet sebesar 1,707 mm pada perlakuan MS ₊ ZPT. Dalam pemberian NBs N2 dalam media subkultur memberikan potensi persentase hidup planlet sebesar 100% pada perlakuan MS ₊ NBs N2.