Mikroba endofit hidup di dalam jaringan tumbuhan dan dapat diekstraksi untuk mendapatkan senyawa aktif. Salah satu mikroba endofit yang dilestarikan adalah kapang endofit, kapang endofit ditemukan pada sistem jaringan tanaman, seperti pada daun, bunga, cabang atau akar tanaman. Kapang endofit tumbuh dengan senyawa dan sifat yang hampir sama dengan tumbuhan inangnya yang terbentuk saat pada jaringan tanaman obat seperti mikotoksin, enzim dan antibiotik tertentu. Kapang endofit didapatkan dari tumbuhan benalu mangga (Dendrophtoe pentandra (L.) Miq) yang merupakan tumbuhan parasit dan mengandung metabolit sekunder. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui daya proteksi antibakteri dan perhitungan diameter zona hambat yang dihasilkan dari ekstrak isolat kapang endofit daun benalu mangga terhadap bakteri Escherichia coli. Metode yang digunakan dalam penelitian ini yakni metode eksperimental dengan analisis data secara deskriptif kuantitatif. Tahapan penelitian dimulai dari persiapan alat dan bahan, sterilisasi alat dan bahan, pembuatan media, peremajaan isolat kapang endofit dan bakteri uji, fermentasi kapang endofit, ekstraksi kapang endofit, uji aktifitas antibakteri secara difusi cakram dan pengukuran diameter zona hambat. Hasil yang didapatkan dari penelitian ini yaitu enam isolat mengandung senyawa antibakteri, antara lain isolat DBM 1, DBM 2, DBM 3, DBM 4, DBM 5, dan DBM 6 ekstrak kapang endofit daun benalu mangga menunjukkan penghambatan yang cukup bagus terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia coli dengan hasil pengukuran diameter zona hambat terbesar yakni 13,17 mm yang dihasilkan oleh isolat DBM 3 pada konsentrasi 75 ppm. Berdasarkan hasil penelitian mengenai uji aktivitas antibakteri pada kapang endofit dari daun benalu mangga (Dendrophtoe pentandra (L.) miq), isolat kapang endofit dapat menjadi agen antibakteri dengan kategori sedang yang terbaharukan.